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在ELISA試劑盒檢查試驗中,包被原的性質(zhì)很主要,蛋白濃度,是不是降解,這到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保留抗原很主要,做重組蛋白時,要在冰浴下緩慢融化即是這個道理。即是讓很多不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地閑暇,然后排斥ELISA試劑盒后的過程中攪擾物質(zhì)的再吸附。但有時因為試驗的需求,包被原的特殊性也可能選用中性的緩沖溶液來包。
ELISA試劑盒操作技巧:
1.加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板外表輕拭吸干。
2.合理安排檢查量,避免反響板過多形成洗板等待時間長。
3.吸取液體時,要用量程和需求量挨近的槍去吸,減少差錯。
4.要盡量做雙孔試驗,這么才既能確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,ELISA試劑盒又能反映出試劑盒的精密度。
5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性。
6.為避免樣品蒸發(fā),試驗時將反響板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
7.未運(yùn)用完的酶標(biāo)板或許試劑,請于2-8℃保留。辣根過氧化物酶符號抗人IgG工作液請依據(jù)所需的量裝備運(yùn)用。請勿重復(fù)運(yùn)用已稀釋過的辣根過氧化物酶符號抗人IgG工作液。
8.ELISA試劑盒試驗中,加樣后及時放人孵箱,標(biāo)本較多時,要分批操作。避免孵育時間人為延伸,致使非特異性結(jié)合緊附于反響孔周圍,難以清潔*。
9.剩下樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
10.ELISA試劑盒洗刷時各孔均需加滿液體,避免孔口有游離酶不能洗凈。